Producción de placas de inmunodifusión radial para la cuantificación de IgG humana

Abstract

Se describe un método para la preparación de placas de inmunodifusión radial para la cuantificación de la lgG humana. El método se basó en las siguientes etapas: (1) aislamiento de lgG de suero normal mediante cromatografía de afinidad; (2) inmunización en cobayo con lgG completa en un esquema breve para evitar la inducción de anticuerpos anti-cadenas livianas; (3) evaluación de la especificidad del antisuero; (4) preparación de las placas y estandarización de las variables; y (5) evaluación del método en estudio frente a un método comercial usado corno referencia. La correlación obtenida fue de 0,93 (p<0,01) lo que nos permite concluir que el método es adecuado, y podría implementarse a escala mayor con fines de producción. A method for the preparation of radial immunodiffusion plates for the quantitation of hum an lgG is described. It is based upon the following steps: (1) isolation of IgG from normal serum by affinity chromatography; (2) immunization of guinea pigs using a short schedule to avoid response against light chains; (3) assessment of antiserum specificity; (4) preparation of pIates and standardization of variables; and, (5) evaluation of the proposed method by a correlation analysis with a commercially - available method utilized as reference. The correlation obtained was 0.93 (p<0.O1), indicating that the method is adequate, providing a basis for a future large - scale production.